主營產品： 安拓思納米技術(蘇州)有限公司專注於納米製劑技術,生物工程技術,納米化工技術。供應的設備包括微射流,熱熔擠出器,高壓均質機,脂質體擠出器,細胞破碎機等。目前在國內外的用戶數量超過1000個。
成功案例

ATS細胞裂解儀—腺相關病毒製備專用

什麽(me) 是腺相關(guan) 病毒

       腺相關(guan) 病毒屬於(yu) 微小病毒科依賴病毒屬，是目前已知的一類結構最簡單的無包膜單鏈DNA缺陷型病毒。直徑約25nm, 由蛋白衣殼和長度為(wei) 4.7kb的單鏈DNA基因組構成，基因組兩(liang) 端為(wei) 兩(liang) 個(ge) T型的末端反向重複序列（ITR），是病毒DNA複製的起點和觸發包裝的信號，基因組的REP基因與(yu) AAV複製有關(guan) ，目前所使用的AAV載體(ti) 均刪除REP基因，使基因組整合的可能性大大降低。已發現12種AAV血清型和100多種AAV突變體(ti) ，不同血清型對組織和器官的親(qin) 和性不同。而且AAV具有安全性高、免疫原性低、病毒滴度高等優(you) 點，是安全級別最高RG1級的基因治療載體(ti) ，被認為(wei) 是“最有前景的基因治療載體(ti) ”。

 

圖：AAV載體(ti) 顆粒

腺相關(guan) 病毒製備

       AVV的生產(chan) 流程跟抗體(ti) 、疫苗類藥物的生產(chan) 類似，主要包含上遊培養(yang) 、下遊純化以及製劑部分。AAV基因療法下遊處理可以占AAV生產(chan) 生產(chan) 總成本的很大一部分，後續對細胞裂解、過濾、純化等步奏具有很大的挑戰。

  圖：AAV載體(ti) 生產(chan) 流程

❏ 純化第一步——細胞裂解

傳(chuan) 統的細胞裂解有以下幾種方式：

A.反複冷凍、解凍再進行低速離心的方法，此方法擴大規模，不適合商業(ye) 化生產(chan) ；

B.采用triton-100表麵活性劑進行裂解，此方法在生產(chan) 過程中相對成本較高，而且降解後產(chan) 物對環境的影響不容小視，未來會(hui) 將限製使用；

C.采用超聲波進行高頻振蕩空穴效應進行破碎，但是在將來很難放大到GMP工廠使用；

所以行業(ye) 類一般偏向於(yu) 使用化學裂解方法來擴大規模。AAV基因療法在將來產(chan) 能放大的要求下，產(chan) 品的工藝放大的可放大性，產(chan) 品穩定性等問題至關(guan) 重要。

❏ 項目難點

A.傳(chuan) 統細胞裂解後，產(chan) 品粘度高，均一性差、過濾性差；

B.AAV生產(chan) 過程中必須實現無菌要求，增大生產(chan) 難度； 

ATS細胞裂解儀(yi)

❏ATS細胞裂解儀(yi) 優(you) 勢：

A.操作簡單化，易於(yu) 使用

B.可無菌裂解

C.專(zhuan) 用的裂解工藝，可平行放大

 

 ❏ATS細胞裂解儀(yi) 技術解讀： 

  • 通過壓力釋放空穴爆破的方式將細胞破碎，破碎效率高，采用純物理的方法破碎細胞，不用引入其他化學試劑，可提高病毒的滴度。

  • 破碎過程中全程低溫控製，可以保證樣品的活性。

  • 破碎細胞的同時可以將樣品中的核酸均質打斷，降低破碎後樣品的粘度，有利於(yu) 後續的樣品分離純化。

  • 設備可以在線SIP, 樣品破碎過程中可不會(hui) 染菌。